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非瘟檢測(cè),一個(gè)樣本的費(fèi)用多少?豬病檢測(cè)知識(shí)知多少?目前豬場(chǎng)或檢測(cè)機(jī)構(gòu)主要開展的檢測(cè)項(xiàng)目及方法介紹先來看一下檢測(cè)項(xiàng)目和方法 檢測(cè)項(xiàng)目里,一方面就是抗體監(jiān)測(cè)。目前主要用的是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),就是ELISA。通過抗體檢測(cè),一方面可以評(píng)估豬場(chǎng)的抗體水平,同時(shí)還可以判斷豬場(chǎng)是否有野毒感染。 表1展示了曾經(jīng)為一家豬場(chǎng)做的藍(lán)耳病抗體檢測(cè)。針對(duì)藍(lán)耳病,有些豬場(chǎng)在用疫苗,有些豬場(chǎng)沒有用疫苗,所以檢測(cè)到抗體之后,要進(jìn)行綜合分析:如果有抗體檢出,要了解豬場(chǎng)的免疫情況,如果沒有免疫過疫苗,有抗體檢出,應(yīng)該說豬場(chǎng)有感染,把它稱為感染抗體,判斷是否感染有經(jīng)驗(yàn)值,S/P≥2.5就證實(shí)豬場(chǎng)有感染;如果說豬場(chǎng)免疫過疫苗,有抗體檢出,應(yīng)該就是免疫產(chǎn)生的抗體。 表1 某豬場(chǎng)藍(lán)耳抗體檢測(cè)結(jié)果
表2是為豬場(chǎng)所做的偽狂犬抗體檢測(cè)。對(duì)于偽狂犬抗體檢測(cè),目前我國(guó)有這么兩類檢測(cè)試劑盒,一是檢測(cè)gB抗體,指的是免疫所產(chǎn)生的抗體,另外是gE抗體,主要指的是感染產(chǎn)生的抗體。目前我國(guó)用偽狂犬的基因缺失疫苗來進(jìn)行免疫,與此同時(shí)可以檢測(cè)gE抗體,如果說有g(shù)E抗體檢出,就證實(shí)豬場(chǎng)中有偽狂犬野毒感染。 表2-1 偽狂犬gB抗體監(jiān)測(cè)(免疫抗體)
表2-2 偽狂犬gB抗體檢測(cè)gE抗體監(jiān)測(cè)(感染抗體)
第2個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目是抗原檢測(cè),可以用于疾病的診斷,包括流行病學(xué)調(diào)查,同時(shí)可以通過定量PCR檢測(cè)方法對(duì)疫苗中抗原含量進(jìn)行評(píng)價(jià),比如有些豬場(chǎng)使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法來進(jìn)行抗原含量檢測(cè)。目前PCR的檢測(cè)方法分為普通PCR和實(shí)時(shí)熒光定量PCR,如很多實(shí)驗(yàn)室自建的等溫檢測(cè)方法,包括LAMP以及重組酶介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增(RPA),這兩類方法敏感性比較高,但也會(huì)出現(xiàn)假陽性的情況。所以在臨床中,普遍采用的是PCR和實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)行抗原檢測(cè)。 第3個(gè),目前在檢測(cè)過程中也可以做耐藥性分析。耐藥性分析主要通過藥敏實(shí)驗(yàn),為*病的防控來篩選敏感藥物。可以用發(fā)病豬的組織涂抹相應(yīng)的培養(yǎng)基,然后貼上藥敏片,最后根據(jù)藥敏片抑菌圈的大小來判定什么樣的藥比較敏感,也可以分離*來做藥敏實(shí)驗(yàn)。 第4個(gè)就是基因測(cè)序,目前在豬中用的最多的就是對(duì)藍(lán)耳病病毒的測(cè)序。通過測(cè)序,可以分析藍(lán)耳病病原的變異情況,從而在臨床中篩選匹配的疫苗。大家知道,藍(lán)耳病是在豬中危害比較大的傳染病,從1996年傳入我國(guó)之后,藍(lán)耳病的毒株具有多樣性。目前,在臨床中主要有三個(gè)毒株,一是經(jīng)典毒株,二是高致病毒株,還有類NADC30毒株。 在藍(lán)耳疫苗的使用過程中,有兩類疫苗,經(jīng)典毒株疫苗和高致病性毒株疫苗,到底該選擇哪個(gè)?我的觀點(diǎn)是這樣的:可以根據(jù)豬場(chǎng)中藍(lán)耳病的流行情況,選擇相應(yīng)的毒株,比如說豬場(chǎng)中主要發(fā)生和流行的是經(jīng)典毒株,就可以用經(jīng)典毒株的疫苗去免疫防控,如果流行的是高致病毒株,就可以選擇高致病毒株的疫苗進(jìn)行防控。因此有必要對(duì)它的基因進(jìn)行分析,目前主要是分析NSP2以及GP5基因。 以上是目前豬場(chǎng)或者檢測(cè)機(jī)構(gòu)主要開展的檢測(cè)項(xiàng)目,以及使用的方法。 針對(duì)這些項(xiàng)目,檢測(cè)機(jī)構(gòu)就有相應(yīng)的平臺(tái),包括洗滌消毒室、病原學(xué)檢測(cè)室、血清學(xué)檢測(cè)室,另外還有分子生物學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室,有些單位還有病理學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。依靠這樣的平臺(tái),就可以從事血清學(xué)、*學(xué)、病毒學(xué)、分子生物學(xué)的檢測(cè),并能評(píng)估耐藥風(fēng)險(xiǎn),因此可以為豬場(chǎng)提供相應(yīng)的服務(wù)。目前大多數(shù)檢測(cè)機(jī)構(gòu),對(duì)常發(fā)的病,比如藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒、豬瘟、偽狂犬、細(xì)小、乙型腦炎等都可以進(jìn)行檢測(cè)。 - 以下是部分問答 - 答:現(xiàn)在基層生產(chǎn)中由于缺乏相應(yīng)的檢測(cè)平臺(tái),所以這方面會(huì)有一定的困難,建議如果在生產(chǎn)中沒有檢測(cè)設(shè)備可以用檢測(cè)試劑條進(jìn)行初步的篩查,確診就需要將收集的樣本送到專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室來進(jìn)行檢測(cè)。 答:對(duì)于病原檢測(cè)目前用到的試劑盒有兩大類:一是核酸類的檢測(cè)試劑盒,另一個(gè)是檢測(cè)卡。核酸的檢測(cè)試劑盒包括PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR兩類,檢測(cè)費(fèi)用在200元左右。抗體檢測(cè)主要用的是酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),樣本的費(fèi)用大概是30~50元。 答:豬場(chǎng)在送檢的時(shí)候可能會(huì)把同樣的樣本送給2~3家或者更多的單位進(jìn)行檢測(cè)。關(guān)于檢測(cè)誤差有以下幾個(gè)方面的因素:*是與送檢的樣本有很大的關(guān)系,同一頭豬采取樣本的部分不同可能檢出的結(jié)果就不同;第二是盡量送檢到正規(guī)的檢測(cè)機(jī)構(gòu)來進(jìn)行檢測(cè),如果自行檢測(cè),*購買正規(guī)的檢測(cè)試劑盒,來避免檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)誤差。 答:中和抗體是豬得到保護(hù)很重要的抗體,但在臨床檢測(cè)中對(duì)中和抗體檢測(cè)的還不是很多。 答:膠體金指的就是檢測(cè)卡,它的特點(diǎn)是快速,基本上5分鐘就可以出結(jié)果,主要是基層或是現(xiàn)場(chǎng)的快速診斷。但是跟目前抗原檢測(cè)類的比較起來,它的敏感性較差,不夠準(zhǔn)確。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部在第1批所發(fā)布的非洲豬瘟中國(guó)檢測(cè)試劑盒中曾經(jīng)也做過比對(duì)實(shí)驗(yàn),檢測(cè)卡的敏感性在66%~67%。 答:組織做藥敏試驗(yàn)是目前藥敏實(shí)驗(yàn)中很重要的方法,這種方法比較快,今天做明天就可以出結(jié)果。如果需要精準(zhǔn)*是用純培養(yǎng)物來做,但在臨床中涉及到要及時(shí)的防控,需要迅速出結(jié)果,建議選取有代表性的樣品組織。藥敏實(shí)驗(yàn)對(duì)培養(yǎng)基選擇也是很重要的,需要給*培養(yǎng)提供充足的營(yíng)養(yǎng)因子如血清等。 答:這個(gè)問題也是廣大養(yǎng)殖戶普遍關(guān)心的問題,就是送檢結(jié)果可能跟他預(yù)想的可能不太一樣。所以送檢的樣本一定要有代表性,送檢的樣本是有發(fā)病典型癥狀的豬2~3頭,這樣檢測(cè)的結(jié)果準(zhǔn)確度會(huì)高一些。 答:豬的淋巴結(jié)、脾臟、肺臟、腎臟都可以送檢進(jìn)行檢測(cè)。另外目前有些新的技術(shù)也可以使比如唾液用于藍(lán)耳病的檢測(cè)。 |